elisa试剂盒开封以后可以在4度冰箱里放多久？

国产还是进口，进口长久一些，试剂盒没用明确保存时间，基本上打开后最佳是30天以内（4度）

关键是你想啊，包被的东西，出厂就弄好了，这个就要一段时间，再到你手上。。。最好打开一次全用。。。。其实试剂盒也没多少钱，我们经常就是用十几个孔就换新的了。。。。1个月的话，没问题，但是最好这次用不完，就别用了

下午我问导师了，导师说半年。。。。。你才1各月，没事的，放心用

组织做elisa样品一般稀释多少

包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中，在低温可保留数月。ELISA试剂盒包被的最适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化，每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。但在间接法测定中，封锁一般是不可少的。

ELISA的夹心法和竞争法的区别

这个跟你的样本中含有检测指标的丰度有关系。比如你想检测小鼠血清中IgG的含量，就必须大概知道IgG在血清中浓度的含量是什么数量级，并且知道你的ELISA试剂盒的检测范围是什么，综合考虑下来才能决定稀释比例。

初次实验建议你对你的样品进行大比例梯度稀释，如1:5000,1:20000,1:80000....

竞争法一般用于检测无法同时与两种抗体结合的小分子抗原，其原理为：

将针对小分子抗原的抗体包被在酶标板上，检测时加入待测样本，使样本中的待测抗原与酶标板上的抗体结合。然后加入HRP酶标记的抗原，此抗原也可与酶标板上的抗体结合，由于酶标板上固著的抗体数量有限，因此当样本中抗原的量越多，则HRP酶标记抗原可结合的包被抗体就越少，两种抗原竞争结合包被抗体，所以称为竞争法。接着加入HRP酶的底物TMB，TMB被酶催化发生颜色反应，当样本中抗原量越多，代表酶标板孔内留下的HRP标记抗原越少，显色也就越浅。百特纯大分子Meretciel的测激素的ELISA试剂盒有些就是竞争法的。

夹心法又叫双抗夹心法，用于检测较大分子的抗原或抗体，又分为：双抗体夹心法，用于检抗原；和双抗原夹心法用于检抗体。以双抗体夹心法为主，下面以双抗体夹心法为例讲解原理（双抗原夹心法类似）：

首先将具有专一性之抗体包被（coating）于酶标板上，检测时加入待测样本，样本中若含有待测抗原，则会与酶标板上包被的抗体专一性结合，然后加入另一种针对待检抗原的抗体，通常称为检测抗体，包被抗体和检测抗体将抗原夹在中间所以叫双抗夹心。检测抗体通常带有HRP酶标记，接着加入HRP酶的底物TMB，TMB被酶催化发生颜色反应，样本中抗原量越多则显色越深。现在很多ELISA试剂盒生产厂家比如：优尔生和百特纯大分子Meretciel将生物素-亲和素放大系统引入双抗夹心法，也就是在检测抗体上标记生物素，然后加入HRP酶标记的亲和素（或链亲和素），利用亲和素可以和生物素分子紧密结合的特性，将HRP酶连接到检抗上，接着加入底物显色。也有引入二抗的，如下图，检测抗体不标记，再加入HRP标记的二抗与检测抗体结合

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